Описание "Среды для микобактерий туберкулеза"

Питательная среда для выделения микобактерий туберкулеза готовая к употреблению (Среда Левенштейна-Йенсена)

Среда предназначена для выделения МБТ, атипичных микобактерий из инфицированного материала (мокрота, моча и др).

Представляет собой однородную массу светло-зеленого цвета в виде косячка с гладкой поверхностью и незначительным конденсатом на дне пробирки.

Состав: калий дигидроортофосфат, магний сернокислый 7-водный, натрий лимоннокислый трехзамещенный, L .-аспарагин, глицерин, малахитовый зеленый, яйцо куриное, вода дистиллированная.

Приготовление. Питательная среда готова к употреблению.

Учет результатов. Рост на питательной среде МБТ бычьего вида и человеческого вида обнаруживается через 21-40 сут.

МБТ человеческого вида растут в виде шероховатых R -колоний желтого цвета, могут встречаться сливающиеся между собой S -варианты. МБТ бычьего вида растут в виде гладких влажных колоний сероватого цвета. При отсутствии роста посевы инкубировать до 2,5 мес.

Посев исследуемых культур проводить согласно приказу N 109 от 21 марта 2003 г . «О совершенствовании противотуберкулезных мероприятий в Российской Федерации», М., 2003.

Упаковка. Среда в пробирках по 6,5 мл, свернутая в скошенном положении. Пробирки упакованы в коробку по 10 штук.

Хранение. Хранить препарат следует в вертикальном положении в коробках в сухом, защищенном от света месте при температуре от 2 до 8°С.

Срок годности - З месяца.

Среда Левенштейна-Йенсена готовая к употреблению обладает бесспорным преимуществом перед аналогичной средой - лиофилизатом, а именно: высеваемость микробактерий на 20% выше, чем на лиофильно высушенной среде, что существенно для бактериологической диагностики. Кроме того, экономятся время, материальные и трудовые затраты.

Основа питательной среды Левенштейна-Йенсена для выделения и культивирования микобактерий туберкулеза сухая

Основа предназначена для приготовления в лабораторных условиях среды Левенштейна-Йенсена, которая используется для выделения, культивирования и для определения лекарственной чувствительности МБТ.

Представляет собой мелкодисперсный порошок темно-зеленого цвета, гигроскопичен, светочувствителен.

Состав: калий дигидроортофосфат, магний сернокислый, натрий лимоннокислый трехзамещенный, L .-аспарагин, глицерин, малахитовый зеленый.

Приготовление. 14,90 г основы растворить в 1 л дистиллированной воды, добавить 21,7 мл глицерина, тщательно перемешать и довести до кипения. Стерилизовать автоклавированием в течение 20 мин. при температуре 121° С, затем охладить до температуры 45-50°С. для приготовления среды Левенштейна-Йенсена после охлаждения в основу стерильно внести 1667 мл яичной массы, перемещать, разлить в пробирки по 6,5 мл. Коагуляцию проводить при температуре 85°С в течение 45 мин. в скошенном положении под углом 20-30°. Затем пробирки поставить на 2 сут. в термостат при температуре (З7±1)°С для контроля стерильности.

При необходимости для определения лекарственной устойчивости МБТ перед свертыванием в среду добавляют противотуберкулезные препараты в различных концентрациях.

Учет результатов. Рост на питательной среде МБТ человеческого и бычьего вида обнаруживается через 21-40 сут.

МБТ человеческого вида растут в виде шероховатых R -колоний желтого цвета, могут встречаться сливающиеся между собой S -варианты. МБТ бычьего вида растут в виде гладких влажных колоний сероватого цвета. При отсутствии роста посевы инкубировать до 2,5 мес.

Посев исследуемых культур и определение лекарственной устойчивости проводить согласно приказу 109 от 21 марта 2003 г . «О совершенствовании противотуберкулезных Мероприятий в Российской федерации», М., 2003.

Упаковка. Препарат расфасовывают по 200 г в полиэтиленовые банки.

Хранение. Хранить препарат следует в герметично закрытой упаковке в сухом, защищенном от света месте при температуре от 2 до 30° С.

Срок годности - 2 года.

Преимущество основы: возможность определения лекарственной устойчивости микобактерий путем добавления противотуберкулезных препаратов в процессе изготовления среды, удобство в использовании.

Основа питательной среды Финна-II для выделения и культивирования микобактерий туберкулеза сухая

Основа предназначена для приготовления в лабораторных условиях среды финна-II, применяемую для выделения и культивирования МБТ, атипичных микобактерий из клинического материала.

Представляет собой мелкодисперный порошок темно-зеленого цвета, гигроскопичен, светочувствителен.

Состав: калий дигидроортофосфат, магний сернокислый 7-водный, натрий лимоннокислый трехзамещенный, квасцы железоаммонийные, аммоний лимоннокислый однозамещенный, натрий глутаминовокислый, крахмал водорастворимый, малахитовый зеленый.

Приготовление. 52,2 г основы растворить в 1 л дистиллированной воды, добавить 20,0 мл глицерина, тщательно перемещать и довести до кипения, кипятить 2 мин., стерилизовать автоклавированием в течение 20 мин при температуре 121°С, остудить до температуры 45-50°С. для приготовления среды финна-II после охлаждения в основу стерильно внести 2 л яичной массы, перемешать, разлить в стерильные пробирки по 6,5 мл. Коагуляцию проводить при температуре 85°С в течение 45 мин, в скошенном положении под углом 20-30°. Затем пробирки поставить на 2 сут. в термостат при температуре (37±1)°С для контроля стерильности.

Готовая основа должна быть темно-зеленого цвета. Готовую основу можно использовать в течение 1 мес. при условии хранения ее при температуре 2-8° С.

Учет результатов. Рост на питательной среде МЬТ человеческого и бычьего вида обнаруживается через 21-40 сут.

МБТ человеческого вида растут в виде шероховатых R -колоний желтого цвета, могут встречаться сливающиеся между собой S -варианты. МБТ бычьего вида растут в виде гладких влажных колоний сероватого цвета. При отсутствии роста посевы инкубировать до 2,5 мес.

Посев исследуемых культур и определение лекарственной устойчивости проводить согласно приказу 109 от 21 марта 2003 г . «О совершенствовании противотуберкулезных мероприятий в Российской Федерации», М., 2003.

Упаковка. Препарат расфасовывают по 200 г в полиэтиленовые банки.

Хранение. Хранить препарат следует в герметично закрытой упаковке в сухом, защищенном от света месте при температуре от 2 до 30°С.

Срок годности - 2 года.

Преимущество основы: высеваемость МБТ на среде Финна-II на 6-8% выше, чем на среде Левенштейна-Йенсена. Использование двух сред одновременно повышает процент выделения МБТ из патологического материала.

Питательная среда для культивирования микобактерий туберкулеза сухая (МБТ - бульон)

Среда предназначена для культивирования, ускоренного выявления МБТ культурально-микроскопическим методом и определения лекарственной чувствительности МБТ.

Представляет собой мелкодисперсный порошок светло-желтого цвета, гигроскопичен, светочувствителен.

Состав: панкреатический гидролизат казеина, зкстракт кормовых дрожжей, калий дигидроортофосфат, динатрий фосфат обезвоженный, магний сернокислый, натрий лимоннокислый трехзамещенный, железо лимонноаммиачное.

Приготовление. Препарат, в количестве указанном на этикетке, размешать в 970 мл дистиллированной воды, содержащей 30 мл глицерина, кипятить в течение 1-2 мин., профильтровать через бумажный фильтр, разлить в стерильные пробирки по 2 мл и стерилизовать автоклавированием при температуре 121° С в течение 15 мин. Среду охладить до температуры 20-25° С и внести в каждую пробирку по 0,2 мл плазмы человеческой крови или нормальной лошадиной сыворотки. Готовая среда должна быть светло-желтой.

Учет результатов. учет проводить через 9-1 1 сут. инкубации посевов. МЬТ растут в виде придонного осадка с диффузным помутнением среды. Посев исследуемых культур проводить согласно приказу М 109 от 21 марта 2003 г . ’хО совершенствовании противотуберкулезных мероприятий в Российской Федерации», М,. 2003.

Упаковка. Препарат расфасовывают по 150 г в полиэтиленовые банки.

Хранение. Хранить препарат следует в герметично закрытой упаковке в сухом, защищенном от света месте при температуре от 2 до 30° С.

Срок годности - 1 год.

Преимущество препарата перед аналогичной средой Школьниковой лабораторного изготовления: стандартность, высокое качество, простота в приготовлении.

Патент N 2193061 от 20.11.2001

Питательная среда для определения чувствительности микобактерий туберкулеза к противотуберкулезным препаратам готовая к употреблению

Среда предназначена для определения чувствительности МБТ к противотуберкулезным препаратам.

Представляет собой однородную массу светло-зеленого цвета в виде косячка с гладкой поверхностью и незначительным конденсатом на дне пробирки.

Состав: калий дигидроортофосфат, магний сернокислый 7-водный, натрий лимоннокислый трехзамещенный, L .-аспарагин, глицерин, малахитовый зеленый, яйцо куриное, вода дистиллированная, стрептомицин (или канамицин, или рифампицин, или этионамид, или этамбутол, или тубазид).

Приготовление. Питательная среда готова к употреблению.

Учет результатов. Визуально регистрируют рост на питательной среде МБТ через 27-29 сут. и проводят подсчет колоний микобактерий, выросших на поверхности среды.

Посев исследуемых культур проводить согласно приказу N 109 от 21 марта 2003 г .

«О совершенствовании противотуберкулезных мероприятий в Российской Федерации»,

М., 2003.

Упаковка. Среда в пробирках по 6,5 мл, свернутая в скошенном положении. Пробирки упакованы в коробку по 10 штук.

Хранение. Хранить препарат следует в вертикальном положении в коробках в сухом, защищенном от света месте при температуре от 2 до 8°С.

Срок годности —2 месяца.

Питательная среда для ускоренного определения лекарственной устойчивости микобактерий туберкулеза сухая

Среда предназначена для ускоренного определения лекарственной устойчивости МБТ (в течение 7 суток).

Представляет собой мелкодисперсный порошок кремового цвета, гигроскопичный, светочувствительный.

Состав: натрий-1.-глутаминовокислый кислый, калий дигидроортофосфат, динатрий фосфат б/в, магний сернокислый, железо лимонноаммиачное, Натрий лимоннокислый трехзамещенный, марганец-ii сернокислый 5-водный, тиамин-бромид.

Приготовление. Навеску препарата размешать в 940 мл дистиллированной воды, кипятить в течение 1 мин., профильтровать через бумажный фильтр, разлить в стерильные пробирки по 2 мл, стерилизовать автоклавированием при температуре 121°С в течение 20 мин. Готовая среда должна быть бесцветной. Пробирки со средой (без лекарственных препаратов) можно использовать в течение 7 суток при условии хранения их в холодильнике при температуре 2-8° С. Пробирки со средой, содержащей препараты, должны быть использованы в тот же день. Перед использованием в каждую пробирку внести по 0,2 мл нормальной лошадиной сыворотки и 0,1 мл раствора одного из противотуберкулезных препаратов. После внесения растворов препаратов в пробирки с 2 мл питательной среды конечная концентрация их должна соответствовать стандартным критериям резистентности МБТ: изониазид — 1 мкг/мл, рифампицин —2 мкг/мл, стрептомицин — 5 мкг/мл, этамбутол 2 мкг/мл. Исследуемые культуры, выросшие на плотной (яичной) среде взвесить на торсионных весах и внести в пробирку с 1 мл среды Сотона, растереть стеклянной палочкой и добавить среду Сотона до получения суспензии 2 мг/мл. По 0,1 мл суспензии внести в пробирки со средой и раствором противотуберкулезных препаратов (конечная концентрация микробов 0,1 мг/мл). Посевы инкубировать в термостате в течение 7 суток при температуре (371)°С. После окончания срока инкубации в пробирку внести по 0,1 мл 2%-ного раствора 2,3,5 трифенилтетразолия хлористого в среде Сотона.

Учет результатов. Учет реакции проводить через 3, 6, 24 часа. Появление розового осадка в пробирках со средой и противотуберкулезными препаратами свидетельствует о наличии устойчивости МБТ к данному препарату.

Количественный учет реакции:

+ - розовый осадок в центре донышка пробирки;

++ - розовый осадок покрывает дно пробирки;

- розовый осадок покрывает дно и поднимается на стенки пробирки.

Посев исследуемых культур проводить согласно методическим рекомендациям <Современные методы лабораторной диагностики туберкулеза», М., 1992.

Упаковка. Препарат расфасовывают по 200 г в полиэтиленовые банки.

Хранение. Хранить препарат следует в герметично закрытой упаковке в сухом, защищенном от света месте при температуре от 2 до ЗОО С.

Срок годности —2 года.

Преимущество среды: ускорение получения результата, позволяющее своевременно приступить к лечению.

Патент N 2252260 от 20.05.2005

Основа питательной среды для идентификации микобактерий туберкулеза сухая

Основа предназначена для идентификации МБТ и дифференциации от атипичных микобактерий. Может быть использована для выделения атипичных микобактерий из клинического материала.

Представляет собой мелкодисперсный порошок темно-зеленого цвета, гигроскопичен, светочувствителен.

Состав: калий дигидроортофосфат, магний сернокислый 7-водный, натрий лимоннокислый трехзамещенный, [-аспарагин, натрий салициловокислый, малахитовый зеленый.

Приготовление. 14,3 г препарата размещать в 1 л дистиллированной воды, внести 20,8 мл глицерина, довести до кипения, кипятить 2 мин., отфильтровать через ватный фильтр, разлить во флаконы и стерилизовать автоклавированием при температуре 121° Св течение 30 мин., охладить до температуры 50° С. Затем в основу питательной среды стерильно внести 1702,7 мл яичной массы, перемещать, разлить в пробирки по 6,5 мл. Коагуляцию проводить при температуре 85°С в течение 45 мин в скошенном положении под углом 20-30°. Затем пробирки поставить на 2 сут. в термостат при температуре (37 1 )° С для контроля стерил ьности. Готовая основа должна быть темно-зеленого цвета. Готовую основу можно использовать в течение 1 мес. при условии хранения ее при температуре 2-8° С.

Учет результатов. На питательной среде рост МБТ человеческого и бычьего вида подавляется. Рост на питательной среде атипичных микобактерий: М. хе n орi, М. kansasii , М.а vium , М. fortuitum обнаруживается через 4-10 сут. инкубирования посевов, а М. i ntracelluare , М. scrofulaceum через 27-30 суток. Атипичные микобактерии растут в виде гладких колоний желтого цвета или с различными оттенками, сливающиеся между собой.

Посев исследуемых культур проводить согласно приказу 109 от 21 марта 2003 г . «О совершенствовании противотуберкулезных Мероприятий в Российской федерации>, М., 2003.

Упаковка. Препарат расфасовывают по 200 г в полиэтиленовые банки.

Хранение. Хранить препарат следует в герметично закрытой упаковке в сухом, защищенном от света месте при температуре от 2 до 30° С.

Срок годности -2 года.

Основа питательной среды типа Миддлбрука для выделения и культивирования микобактерий туберкулеза сухая

Основа питательной среды типа Миддлбрука предназначена для выделения и культивирования МБТ из клинического материала при диагностике туберкулеза. Основу среды (без крахмала) можно использовать для определения лекарственной устойчивости МБТ после внесения в среду соответствующего противотуберкулезного препарата.

Представляет собой мелкодисперсный порошок желтого цвета, гигроскопичен, светочувствителен.

Состав: панкреатический гидролизат казеина, зкстракт кормовых дрожжей, аммоний сернокислый, 1.-глутаминовая кислота, калий дигидроортофосфат, динатрий фосфат обезвоженный, Натрий лимоннокислый трехзамещенный, железо лимонноаммиачное, магний сернокислый, крахмал водорастворимый, натрий хлористый, малахитовый зеленый, агар микробиологический.

Приготовление. 45,4 г препарата размешать в 840 мл дистиллированной воды, добавить 10 мл глицерина, тщательно перемешать и довести до кипения, кипятить 2 мин. Раз- лить во флаконы, стерилизовать автоклавированием при температуре 121°С в течение 20 мин., затем остудить до температуры 45-50°С. В основу стерильно внести 150 мл нормальной лошадиной сыворотки, перемещать, разлить в стерильные пробирки по 6,5 мл Затем пробирки необходимо выдержать в термостате 2 сут. при температуре (З71)°С для контроля стерильности. Готовая среда светло-зеленого цвета. Готовую среду можно использовать в течение 1 мес., при условии хранения ее при температуре 2-8°С.

Учет результатов. Рост на среде МБТ обнаруживается через 21-40 сут.

МБТ человеческого вида растут в виде шероховатых -колоний белого или желтоватого цвета, могут встречаться сливающиеся между собой 5-варианты. МБТ бычьего вида растут в виде гладких влажных колоний сероватого цвета. При отсутствии роста посевы инкубировать до 2,5 мес.

Посев исследуемых культур и определение лекарственной устойчивости проводить согласно приказу 109 от 21 марта 2003 г . «О совершенствовании противотуберкулезных мероприятий в Российской федерации», М., 2003.

Упаковка. Препарат расфасовывают по 200 г в полиэтиленовые банки.

Хранение. Хранить препарат следует в герметично закрытой упаковке в сухом, защищенном от света месте при температуре от 2 до 30° С.

Срок годности -2 года.

Преимущество основы: возможность определения лекарственной устойчивости микобактерий путем добавления противотуберкулезных препаратов в процессе изготовления среды, удобство в использовании.

Основа питательного бульона типа Миддлбрука для культивирования микобактерий туберкулеза сухая

Основа питательного бульона типа Миддлбрука предназначена для культивирования МБТ из клинического материала при диагностике туберкулеза. Основу питательного бульона можно использовать для определения лекарственной устойчивости МБТ после внесения в среду соответствующего противотуберкулезного препарата.

Представляет собой мелкодисперсный порошок желтого цвета, гигроскопичен, светочувствителен.

Состав: панкреатический гидролизат казеина, экстракт кормовых дрожжей, аммоний сернокислый, 1-глутаминовая кислота, калий дигидроортофосфат, динатрий фосфат обезвоженный, натрий лимоннокислый трехзамещенный, железо лимонноаммиачное, магний сернокислый.

Приготовление. 14,7 г препарата растворить в 900 мл дистиллированной воды, добавить 4 мл глицерина, тщательно перемешать и довести до кипения, кипятить 1 мин. Разлить во флаконы, стерилизовать автоклавированием при температуре 121°С в течение 20 мин., затем остудить до температуры 45-50° С, затем стерильно внести 100 мл нормальной лошадиной сыворотки, перемешать, разлить в стерильные пробирки по 4,5 мл. Затем пробирки поставить на 1 сут. в термостат при температуре (З71)°С для контроля стерильности. Готовая среда желтого цвета. Готовую среду можно использовать в течение 10 сут. при условии хранения ее при температуре 2-8°С.

Учет результатов. Рост МБТ обнаруживается на 9-1 Одень в виде придонного роста, возможно образование пленки на поверхности среды.

Посев исследуемых культур и определение лекарственной устойчивости проводить согласно приказу 109 от 21 марта 2003 г . О совершенствовании противотуберкулезных мероприятий в Российской Федерации>, М., 2003.

Упаковка. Препарат расфасовывают по 200 г в полиэтиленовые банки.

Хранение. Хранить препарат следует в герметично закрытой упаковке в сухом, защищенном от света месте при температуре от 2 до 30° С.

Срок годности – 1 год.

Преимущество основы: возможность определения лекарственной устойчивости микоба ктерий путем добавления противотуберкулезных препаратов в процессе изготовления среды, удобство в использовании, стандартность по сравнению со средой лабораторного приготовления.

Основа питательной среды для выделения и культивирования микобактерий туберкулеза из очагов внелегочной локализации сухая

Основа питательной среды предназначена для выделения и культивирования МБТ из клинического материала при диагностике внелегочного туберкулеза.

Представляет собой мелкодисперсный порошок темно-зеленого цвета, гигроскопичен, светочувствителен.

Состав: магний сернокислый 7-водный, натрий лимоннокислый трехзамещенный, квасцы железоаммонийные, калий дигидроортофосфат, аммоний лимоннокислый однозамещенный, натрий глутаминовокислый, крахмал водорастворимый, 1.-цистеин гидрохлорид, малахитовый зеленый.

Приготовление. 53 г препарата размешать в 980 мл дистиллированной воды, добавить 20,0 мл. глицерина, тщательно перемешать, довести до кипения, кипятить в течение 2 мин., разлить во флаконы и стерилизовать автоклавированием в течение 20 мин. при температуре 1 21°С. Остудить до температуры 45-50°С, затем добавить 2 л яичной массы, перемешать и разлить в стерильные пробирки по 6,5 мл Коагуляцию среды провести при температуре 85°С в течение 45 мин. в скошенном положении под углом 20-30°. Затем пробирки необходимо выдержать в термостате 2 сут. при температуре (З7±1)°С для контроля стерильности.

Готовая основа должна быть темно-зеленого цвета. Готовую основу можно использовать в течение 1 мес. при условии хранения ее при температуре 2-8°С.

Учет результатов. Рост на питательной среде МБТ обнаруживается на 21-40 сут.

МБТ человеческого вида растут в виде шероховатых Р-колоний белого или слегка желтоватого цвета, могут встречаться сливающиеся между собой 5-варианты. МБТ бычьего вида растут в виде гладких влажных колоний сероватого цвета. При отсутствии роста посевы инкубировать до 2,5 мес.

Посев исследуемых культур проводить согласно методическим рекомендациям «Современные методы лабораторной диагностики туберкулеза», М., 1992 и приказу N 109 от 21 марта 2003 г . «О совершенствовании противотуберкулезных мероприятий в Российской Федерации», М., 2003.

Упаковка. Препарат расфасовывают по 200 г в полиэтиленовые банки.

Хранение. Хранить препарат следует в герметично закрытой упаковке в сухом, защищенном от света месте при температуре от 2 до 30° С.

Срок годности - 2 года.

Преимущество основы: удобство в использовании, стандартность по сравнению со средой лабораторного приготовления.